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南京生物制品有限公司談蛭弧菌凍干粉應用前景

2018-11-28 10:09:44   

近兩年,蛭弧菌凍干粉市場突然大熱起來。細思下來,一方面水產養(yǎng)殖的密度在增加,各種未知疾病或者混合型疾病日益增多;另一方面,從公司至經銷商再到養(yǎng)殖戶,面對日益增加又難以查明的疾病,多數是束手無策,很多化學型消毒劑,效果來的快去的也快,有時候刺激大一些,而且也不能總是經常使用,因此蛭弧菌又重新被大家推廣起來。

近期,江蘇南京新的生物制品有限公司于10月中旬在蛭弧菌凍干上面投入近百萬采購了一臺大型凍干機(單次凍干1萬瓶),實現了從蛭弧菌母液發(fā)酵到凍干全過程的可控制。這種近百萬的大型凍干機投入到底劃算不劃算?為此筆者采訪了南京新的生物制品有限公司負責水產事業(yè)版塊的趙經理,希望就蛭弧菌的凍干產品做一些了解。

問:蛭弧菌和普通微生物產品有什么不同?趙經理:首先,效果表達的途徑不一樣。普通微生物在水產養(yǎng)殖上發(fā)揮效果大多數是通過“占位理論”實現的(在體外或體內),或者通過分泌胞外物質抑制其他微生物繁殖而發(fā)揮效果,而蛭弧菌不是,蛭弧菌具有“不服則干”的特性,其通過寄生和裂解的生理手段,能在體外直接殺滅一些有害菌,還能在體內發(fā)揮有益微生物的效果,這使得蛭弧菌有著益生素和“活性抗生素”的雙重特性。

其次,在發(fā)酵上面,普通微生物發(fā)酵是在人工合成的培養(yǎng)基里接種菌種。而蛭弧菌發(fā)酵則要先生產大腸桿菌,提供宿主菌,再接種蛭弧菌種。

另外,普通的微生物一般是通過無性二分裂方式繁殖,而蛭弧菌是通過復制的方式繁殖。前者繁殖速度很快,后者的速度較慢。

問:為什么南京新的生物在凍干設備上投入近百萬?

趙經理:南京新的生物制品有限公司之所以在凍干設備上投入如此資金,主要是考慮以下幾點:

1.南京新的生物生產蛭弧菌已有10多年的時間,蛭弧菌產品的演變也一直非常關注,最早的液體產品,我們就一直用發(fā)酵罐進行生產,但是液體產品的保藏始終面臨一些問題,這對實際使用效果有非常大的影響,南京新的生物也一直在思考如何突破技術和成本的雙重難關,而凍干則是最好的一種保存方式。

2.我們一直在關注凍干,也組織了專家對凍干產品的原理及與蛭弧菌的結合做了論證,早期主要是硬件的成本投資太高,同時產品銷量預估受第一階段蛭弧菌下降的影響,未敢一次性投入,于是采取代工的形式生產蛭弧菌凍干粉,此期間,我們做了大量的試驗,確保了蛭弧菌凍干粉產品的穩(wěn)定性,同時也確定了蛭弧菌原裝凍干在產品保質期上的突破具有無與倫比的優(yōu)勢。

3.近兩年養(yǎng)殖密度整體是呈現上升趨勢,而且生態(tài)防控這個概念也不斷加強,水體內的總菌數、異養(yǎng)菌數、弧菌數的控制變成一個難題,只依靠化學類消毒劑無法完成這個工作,因為化學消毒劑效果來得很快,但去的也很快,而蛭弧菌恰恰可以彌補這個缺陷,因為蛭弧菌的缺點是效果來得慢一些,但是中后期的防控時間特別長,其發(fā)揮的效果基本可以達到15天左右,同時再加上成品質量的穩(wěn)定性在不斷進步,所以使用效果上面得到了較好的體現,產品的總量也在增加。

4.我們本身有很多的代工客戶,很多都是在我們公司代工生產蛭弧菌液體,這兩年隨著市場對蛭弧菌凍干粉的呼聲越發(fā)高漲,他們也在催促我們上一臺凍干機,可以讓他們有更多的選擇。

綜合以上幾個方面,公司在2018年下定決心,于10月份采購了一臺價值近百萬的大型凍干機,以完成從蛭弧菌母液發(fā)酵至蛭弧菌凍干的全程掌控,從而能為客戶提供穩(wěn)定的蛭弧菌原裝凍干產品。

問:蛭弧菌“原裝凍干”有哪些產品優(yōu)勢?趙經理:目前蛭弧菌類產品基本上有兩類,一是液體,一是凍干粉。

蛭弧菌液體的產品始終面臨保存的問題,實際上也有很多的論文對此做了研究,有的文章指出,大多數的液體蛭弧菌產品在4℃的環(huán)境下,可以保存8個月以上,少數6個月以上。但在25℃的環(huán)境下,蛭弧菌液體產品的保質一般只在4個~6個月了。

當然隨著保護劑的不斷研發(fā),隨著添加不同的保護劑,在4℃的環(huán)境下,某些液體產品的保質期可以達到15個月以上,有的可以達到兩年以上,但是所有的保存環(huán)境溫度都指向4℃,這對我們實際的銷售場景是不太相符的。當然,液體也有好處,菌種復蘇時間快,如果從實際銷售出發(fā),建議在經銷點增設冷藏柜,這樣可以延長液體產品的保持期。

另外,就是目前大家所接觸比較多的蛭弧菌凍干產品了,尤其是強調蛭弧菌原裝凍干產品。在相關的研究中,4℃的環(huán)境下,添加了保護劑的蛭弧菌液體產品在13個月后其復蘇率為100%,而同樣的環(huán)境下,凍干產品在21個月后其復蘇率仍為100%。

而且真正的蛭弧菌原裝凍干產品,具有以下優(yōu)點:

1.冷凍干燥生產工藝是在低溫下進行的,對于許多熱敏性的物質特別適用。蛭弧菌不會發(fā)生變性或失去生物活力,這一點非常重要。

2.整個冷凍生產過程基本上是在低溫真空狀態(tài)下完成的,在這種狀態(tài)下,微生物的生長和酶作用是受到抑制的,可以很好地保證蛭弧菌產品的穩(wěn)定性。

3.因在真空下操作,氧氣極少,因此,一些易氧化的物質(如油脂類)得到保護。

4.冷凍干燥法能排除95%~99%以上的水分,產品能長期保存而不變質。

以上就是蛭弧菌凍干產品的優(yōu)勢所在,也是其穩(wěn)定性的保障所在。

問:蛭弧菌原裝凍干產品有什么特征?

趙經理:市面上有很多蛭弧菌凍干粉,有很多是呈現流動性粉狀的,也有一些是塊狀的,可能是生產工藝有所差別。但我們還是認為“原裝凍干”是一種最好的工藝,最主要是原裝凍干是在凍干機內完成封裝的,瓶內保持著真空凍干狀態(tài),能最大可能地保存產品的活性,提供產品最好的穩(wěn)定性,原裝凍干產品一般有以下幾個特征:

第一、產品在小的西林瓶中呈現的是一種塊狀物,用手拿起瓶子晃動,感覺像一塊小小的泡沫,有很輕的感覺。另外,就是西林瓶裝的原裝凍干產品肯定不可能是粉劑。

第二、原裝凍干和非原裝凍干產品在包裝上也有所差異,雖然都是西林裝封裝的,但是兩種產品封裝的瓶蓋都會存在明顯差異,主要的原因在于凍干的過程中需要做適當保護,不能直接將液體暴露在環(huán)境中,需要在西林瓶上進行遮蓋,但完全遮蓋是不行的,這會阻擋冰的升華,所以需要用一種帶導氣槽的橡膠皮塞進行半遮蓋,讓瓶內、外的空氣可以流動,不會阻擋冰的升華,而在一般環(huán)境下生產的產品是不需要用這種帶導氣槽的橡膠皮塞的,差異還是很明顯的。

第三、去掉西林瓶蓋上的塑料和鋁包片后,只留下橡膠瓶蓋的時候,用手拔出橡膠瓶蓋的時候,你會明顯的聽到“嘣”的一聲,可以看到凍干的塊狀物在瓶中的跳動,主要的原因,是因為原裝凍干是在凍干機中直接完成封蓋的過程,瓶體中是處于一種真空狀態(tài)的,因此在拔出瓶蓋時,因為瓶內、外壓力的差異極大,空氣的快速流動引起了“嘣”的聲音產生,同時塊狀物會跳動。

第四、極易吸水,1秒溶解。直接的表現就是將水倒進小瓶內,小瓶里的物料1秒就溶解完了,而且溶解均勻。實際上,這主要因為被干燥物料含有的水分是在凍結狀態(tài)下直接蒸發(fā)的,故在干燥過程中,水汽不帶動可溶性物質移向物料表面,不會在物料表面沉積鹽類,即在物料表面不會形成硬質薄皮,亦不存在因中心水分移向物料表面時對細胞或纖維產生的張力,不會使物料干燥后因收縮引起變形,故極易吸水恢復原狀。

問:蛭弧菌如何在水產養(yǎng)殖中如何合理應用?趙經理:任何一種產品要研究其如何應用,肯定是分兩個層面進行探究,一是要符合產品的基本特性,不能違背基本規(guī)律;二是在實際應用場景中,要和現實相結合,尋找最佳的使用方法。

首先要了解蛭弧菌的幾個特性:蛭弧菌的生長,一般要求pH6.0-8.5;溫度23℃~37℃,低于12℃,高于42℃時均不生長;能穩(wěn)定分解蛋白質,一般不利用碳水化合物,而以肽、氨基酸作碳源和能源;能液化明膠;嚴格好氧。同時蛭弧菌的靶向性問題并沒有很多的研究,但總體上其偏向革蘭氏陰性桿菌,只裂解較為少數的革蘭氏陽性桿菌。同時,蛭弧菌的安全性也得到了一些論文的驗證,迄今為止,相關報道表明,蛭弧菌對人和某些動物無毒害作用。

在實際使用中需要注意以下幾點:

第一、溫度不在適宜范圍的時候,蛭弧菌生長是非常緩慢的,所以使用時要充分考慮這一點。比如3月、4月份用它去泡苗,效果肯定不會好,但如果改成拌料投喂,則會對腸道控菌產生積極影響??傮w來說,蛭弧菌使用主要分為內服和外潑兩個方面,內服不受溫度限制,而外潑則要考慮溫度問題。

第二、蛭弧菌的繁殖是需要氧氣的,使用的時候也建議在早上8點~10點使用,這樣可以獲得較為充足的溶氧。另外,其耗氧不會達到非常劇烈的程度,因為其繁殖代時一般要4小時~6小時。

第三、蛭弧菌的安全性應該如何得到最大化的利用呢?

實際上,我們重點推薦在甲殼類動物脫殼期使用蛭弧菌產品,因為甲殼類動物在脫殼期是非常虛弱的,也極易被一些有害菌感染,控菌工作非常重要,但是一些化學消毒劑存在刺激性,同時來的快、去的快,意義不大。而蛭弧菌則完美地解決了這個問題,其幾乎沒有刺激性,控菌時間又長,只不過要求養(yǎng)殖者需要提前2天~3天使用即可,如果在使用補鈣制劑后再使用蛭弧菌,可能繁殖效果會更好,控菌效果也會更明顯。

第四、配合化學消毒劑治療暴發(fā)性疾病。5月~8月份,往往有一些季節(jié)性暴發(fā)的疾病,存在著難治療、易反復等特點,而在使用化學消毒劑的時候,往往存在來得快、去得快的問題,這應該是易反復的主要原因,這個時候,就可以將化學消毒劑與蛭弧菌配合使用了,因為蛭弧菌在這方面有自己的特性:其見效慢,但見效長。見效慢是因為剛繁殖的時候,蛭弧菌需要時間,一般是24小時~48小時才見效;見效長,則是在很多研究中都指明,蛭弧菌控制有害菌的時間可以長達15天左右。

因此,當使用化學消毒劑見效后,在12小時以后即可使用蛭弧菌類產品,每天一次,連續(xù)2次左右,這樣水體的短期、長期控菌就可以做到更好。

第五、定期預防的使用。

定期預防幾個關鍵問題,比如能不能和其他微生物一起使用?多少天使用一次?在上面蛭弧菌的特性中,我們談到其偏向革蘭氏陰性菌,相對裂解較少的革蘭氏陽性菌。

實際上徐琴等人(2009)的研究指出,加噬菌蛭弧菌和黏紅酵母組的試驗效果不理想,表明這兩株菌體之間有一定的拮抗作用。而聯(lián)合使用噬菌蛭弧菌和球形紅假單胞菌(是紫色非硫光合細菌紅假單胞菌屬的一個種)組展示了凈化水質、預防病害的優(yōu)良前景,此組能有效地吸收氨氮、硫化物等有害物質。這也指出了蛭弧菌是直接可以和某些光合細菌直接混合使用的,這一點大大提高了使用的方便性。

另外,淡水漁業(yè)研究中心漁業(yè)環(huán)境保護研究室陳家長等人(2003年)曾在螃蟹養(yǎng)殖中,間隔使用光合細菌和蛭弧菌:每20天用噬菌蛭弧菌和光合細菌各1次,使用方法為使用光合細菌1周后使用噬菌蛭弧菌,實驗周期3個月。其中,蛭弧菌濃度為107cfu/mL,光合細菌為109cfu/mL。這樣間隔使用的效果也非常不錯,25天后養(yǎng)殖中華絨螯蟹實驗組比對照組池塘中的細菌總數少2個數量級,70天后實驗組比對照組池塘中的細菌總數少3個數量級,另外試驗池塘的COD、氨氮及硫化物有明顯的降低,有效地提高了中華絨螯蟹的成活率(本文沒有探討如何混合使用)。

總體來說,如果出于預防考慮,和其他微生物可以間隔使用,這樣最安全。當然如果真要混合使用,可以考慮和一些光合細菌配合,基本上不要考慮酵母或乳酸菌的混合使用了。

另外,間隔使用的話,可以考慮上邊陳家長等人的方案,即7天用一次其他有益菌,之后再使用蛭弧菌,14天之后再用其他有益菌,形成一個使用循環(huán),效果更佳。

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